Edvotek kit nr. 221.
Dit experiment werkt met plasmide getransformeerde bacteriën. Invoeging van het Lac+ fenotype in de getransformeerde bacteriën kan direct worden waargenomen doordat de bacteriën blauwe kolonies vormen wanneer ze worden gekweekt op ampicillinehoudende agar.
Bacteriën met het geïnvoegde en werkende plasmide DNA groeien als blauwe kolonies op de agar. Deze getransformeerde bacteriën kunnen alleen groeien in aanwezigheid van antibiotica in de agar en als het plasmide DNA op de juiste manier in de bacterie is ingebracht. Bekijk de procedure in de afbeeldingenreeks.
LET OP BIJZONDERE WETTELIJKE VOORSCHRIFTEN VOOR HET GEBRUIK VAN DEZE KIT:
Het gebruik van deze kit voor educatieve doeleinden moet worden uitgevoerd door een leraar van de bovenbouw van het voortgezet onderwijs die een tweedaagse competentiecursus heeft gevolgd. De cursus omvat het werken met microbiologische werkmethoden, inclusief steriele techniek en genetische testmethoden, het aanleren van goede laboratoriumpraktijken en afvalbeheer.
De cursus wordt aangeboden door FaDB cf. https://biofag.dk/?page_id=2
Uiterlijk twee weken voor het uitvoeren van experimenten met genetisch gemodificeerde organismen moet het geplande experiment worden gemeld bij de vakconsulent via de gemeenschappelijke mailbox [email protected]. Het meldingsformulier bestaat uit een voorblad (Bijlage 6) en een bijlage (Bijlagen 1-4). Het formulier voor het melden van experimenten is beschikbaar op de website van het ministerie van Kinderen en Onderwijs op https://www.uvm.dk/gymnasiale-uddannelser/fag-og-laereplaner/stx-laereplaner onder biotechnologie.
De goedgekeurde experimenten blijken uit de bijlagen bij het meldingsformulier, zie bijlagen 1-4 van de overeenkomst, zie Indberetningsskema - bilag (pdf) op https://www.uvm.dk/gymnasiale-uddannelser/fag-og-laereplaner/stx-laereplaner onder biotechnologie.
Specificaties:
Materialen voor 10 groepen
Proefduur 45 min + 5 min. Overnachten incuberen
Eisen aan de apparatuur buiten de inhoud van de kit:
Incubator
2 waterbaden
Warmteplaat/microgolf
Micropipetten (5-50 µl)
Pipetaspirator
Markeerpen
Warmtebestendige handschoenen
Gebeschermde bril
Latex handschoenen
Ice voor ijsbad
Bevoorrading met alle benodigde monstermaterialen naast bovenstaande apparatuur. De transformatiecellen zijn gevriesdroogd, dus de kit is na ontvangst ongeveer 9 maanden houdbaar.
Download de Engelse handleiding via de link op het infoblad dat bij de kit wordt geleverd.
Als u wilt werken met spectrofotometrische bepaling, worden de volgende gegevens verstrekt door Edvotek: Excitatiepiek: 473 nm Emissiepiek: 509 nm
